ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
市面上ELISA試劑盒廠家眾多,質(zhì)量也層次不齊,挑選ELISA試劑盒成為大家重視的重點(diǎn)問(wèn)題。下面我司就怎么挑選ELISA試劑盒從幾個(gè)點(diǎn)來(lái)分析。
一、特異性
ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分,抗體對(duì)有關(guān)。若抗體對(duì)中為多抗,另一個(gè)有必要為單抗,建議運(yùn)用雙單抗。挑選一個(gè)好的ELISA試劑盒,咱們首先要考慮的就是特異性。
二、靈敏度
ELISA試劑盒的好壞往往就取決于靈明度的高低,因而靈敏度也是咱們挑選ELISA試劑盒的一個(gè)重要技術(shù)參數(shù)。靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的才能,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢目標(biāo)的量挑選合適的試劑盒,假如待檢目標(biāo)量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可挑選高敏的 ELISA 試劑盒。
三、重復(fù)性
科學(xué)實(shí)驗(yàn)講究重復(fù)性,一般 ELISA 試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 15% 以內(nèi)。
操作中應(yīng)留神的5個(gè)方面:
1. 跟著病況的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動(dòng)搖,因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。間接法測(cè)定中,標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特異性反響。
2. 加樣一般運(yùn)用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加間斷液。加標(biāo)本時(shí)有必要每份標(biāo)本運(yùn)用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時(shí)則不需更換吸嘴。
3.在成批手藝檢測(cè)中,還應(yīng)留神操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原抗體反響和酶促反響時(shí)間不一致,對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大,不留神可能會(huì)導(dǎo)致過(guò)錯(cuò)效果或定量不準(zhǔn)。
4. 洗刷是ELISA試劑盒操作過(guò)程中決議實(shí)驗(yàn)勝敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除掉未結(jié)合的免疫反響物,間斷抗原抗體反響,除掉標(biāo)本中與反響無(wú)關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反響過(guò)程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。
5. 斷定效果須運(yùn)用ELISA試劑盒測(cè)讀儀,比色法判讀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng),根據(jù)反響液顏色的不同選用不同波長(zhǎng)的濾光片,以空白孔校零測(cè)定反響孔的吸光度值。酶標(biāo)儀具有杰出的重復(fù)性。