BALB/c-nu裸鼠缺乏T細(xì)胞,易受細(xì)菌、病毒和霉菌感染的損害,如按常規(guī)動(dòng)物方式飼養(yǎng),只有少數(shù)裸鼠能生存一個(gè)月以上,zui多不超過四個(gè)月,而放在隔離器(Isolator)中飼料的可存活一年以上。因此,裸鼠的壽命與飼料的衛(wèi)生條件有密切的關(guān)系。一般是先在隔離器中繁殖。然后放入無(wú)特定病原體屏障環(huán)境中飼料。
BALB/c-nu裸鼠無(wú)病原體條件的飼料需要在動(dòng)物和外界之間裝置一個(gè)屏障,屏障越嚴(yán),飼料健康裸鼠就越有保證,然而,如不注意選擇屏障的類型,它的效果就沒有保證,故應(yīng)持續(xù)檢查是否符合條件。
BALB/c-nu裸鼠的無(wú)病原條件飼料設(shè)備:
⑴帶有密封空氣過濾裝置的塑料籠。每一籠自為一個(gè)單元。它包括一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的透明塑料籠,籠蓋上覆有空氣過濾材料。后者與籠子的貼近處用膠帶纏繞數(shù)周予以密封。然后,此籠可置于一般實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)籠架上。過濾材料呈片狀,由疏紡的(但非紡織的)聚酯纖維制成。它應(yīng)該能夠防止微生物從籠外進(jìn)入籠內(nèi)。
全套籠具皆經(jīng)高壓蒸汽滅菌。使用它和喂養(yǎng)管理(如加飲水和飼料、清籠、斷奶等)時(shí),都必須在一個(gè)防護(hù)罩內(nèi)進(jìn)行。罩內(nèi)所含有的是正壓過濾空氣。而且還是層流(無(wú)湍流的)、單向的。
上述的用具有操作方式是存養(yǎng)無(wú)致病原動(dòng)物zui簡(jiǎn)單的方法。
⑵動(dòng)物隔離器。zui常使用的此種器具有系由柔軟片狀的透明聚乙烯基塑料制成,但也可用有機(jī)玻璃、不銹鋼、鋁皮和尼龍等材料來(lái)作。市售成品有一定規(guī)格,也可專門根據(jù)需要來(lái)設(shè)計(jì)大小,這是一個(gè)無(wú)菌的生活小室,可排除任何微生物。室氣進(jìn)出該器都經(jīng)過濾。全部食品和用品都經(jīng)滅菌后,再經(jīng)一個(gè)無(wú)菌的入口小室送入器內(nèi),可排除任何微生物。zui初,選用化學(xué)滅菌劑和高壓蒸氣對(duì)該器進(jìn)行滅菌處理。
在無(wú)菌環(huán)境中,遺傳學(xué)背景相同的裸小鼠和通常的雜合子型小鼠壽命長(zhǎng)短相近。但是,Poiley氏等(1974)發(fā)現(xiàn),在這種環(huán)境中,新生小鼠的存活率,較之在普遍環(huán)境中的為低。為了使它們胃腸道的功能更接近于正常,有人提議給無(wú)菌環(huán)境中的裸鼠接種一次非致病的細(xì)菌(Poliey氏等,1974;Eaton等,1975)。這樣,常常可以起到改進(jìn)生殖性能的作用,并有助于把無(wú)菌小鼠從隔離器中轉(zhuǎn)移到條件較差的存養(yǎng)設(shè)備中去。
為了zui有效的控制環(huán)境,從而得以盡力保存無(wú)菌的(或帶有一定菌群)裸體小鼠,隔離器是理想的存養(yǎng)設(shè)備。但它也有缺點(diǎn),這就是費(fèi)勞力,在一定空間中繁育動(dòng)物的數(shù)量有限。
⑶空氣層流器。它包括標(biāo)準(zhǔn)的小室,覆罩和網(wǎng)架。每套器具形成一個(gè)獨(dú)立的環(huán)境,與室內(nèi)通風(fēng)系統(tǒng)無(wú)關(guān)。它自己輸入過濾空氣,把超凈空氣完滿地注入鼠籠,并以柱狀排出。由于每套器具互不相干,又有正壓空氣防護(hù),所以可把它們放在通常條件下。它們是手提式的,既便于維修,又能zui大限度地利用房舍和設(shè)備。
使用此種方法是否成功,取決于管理工作的好壞。密切監(jiān)視房室的污染和人員流動(dòng),只準(zhǔn)專職人員入室。應(yīng)當(dāng)在正壓、單向氣流條件下料理維修鼠籠,接觸小鼠的一切物品(飼料和其它物品)都必須滅菌。飲水須經(jīng)處理除去細(xì)菌,專職工作者須穿戴無(wú)菌的外科口罩、帽子、手套和后長(zhǎng)衣,觸及動(dòng)物時(shí)須用頭端包有橡皮的鑷子,而且必須經(jīng)變性乙醇(就放在一邊)的浸洗。
⑷空氣層流室。有別于上述的一個(gè)房間內(nèi)放置的小型空氣層流器,而是整個(gè)房間的環(huán)境都為正壓過濾空氣所籠罩。設(shè)計(jì)時(shí),須裝置空氣進(jìn)入的開關(guān),空氣入口要裝指示器。工作人員在室內(nèi)的穿戴同上所述。室內(nèi)應(yīng)用的飼料、墊料和籠具的滅菌,須用兩端有開關(guān)的高壓蒸氣滅菌器。
引種方法可zui大限度地利用房舍以繁育動(dòng)物。雖然裝設(shè)此種房間的經(jīng)費(fèi)昂貴,但是,空氣層流室加上嚴(yán)格限制人員的出入,可保證生育期的裸體小鼠順利生產(chǎn),它是大量繁殖裸小鼠的方式。舉例來(lái)說(shuō),由于采用它,近五年來(lái)(1973~1977),在Frederick癌癥研究中心平均每年生產(chǎn)裸體小鼠在20,000以上。